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核酸分子杂交炉早期用于性病诊断的重组DNA技术。基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下(适宜的温度及离子强度等)可按碱基互补原则形成双链,此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。待测核酸序列为性病病原体基因组或质粒DNA。探针以放射核素或非放射性核素标记,以利于杂交信号的检测。所谓杂交(hydridization)指两个以上的分子因具有相近的化学结构和性质而在适宜的条件下形成杂交体(hybrid),杂交体中的分子不是来自一个二聚体分子。同一个二聚体中的...
1-10
电穿孔效应是指在适当高压脉冲电场作用下,细胞或组织间起相对隔离作用的“屏障”内快速形成液态通道的现象,是电场与具有不同介电常数而且易变形的物质相互作用的结果。从孔的形成、阀值跨膜电压、膜损伤、分子运输、组织穿孔、膜恢复和细胞死亡等方面论述了电穿孔效应的产生机理,并对电穿孔效应的应用进行了总结,在此基础上,结合电穿孔生物效应实验研究和应用特点,设计制作了一台智能化电穿孔仪,该仪器具有矩形脉冲和电容放电脉冲两种波形输出,并且脉冲幅值、脉冲宽度、重复频率可调。方波电穿孔仪的应用:哺...
12-8
紫外交联是一种多用途的紫外辐射系统,主要用于将DNA或RNA交联到尼龙膜、硝酸纤维素膜上。交联过程仅需25-50秒。传统的方法是将膜置于真空烘箱中80℃烘烤2小时。与真空烘箱烘焙相比,紫外交联仪照射可使杂交信号显著增加。此外VL系列紫外交联仪可用于Northern、Southernblotting、EMSA等膜交联,CLIP-seq、iCLIP-seq、PAR-CLIP-seq、pBpa、sulfo-SDA、psoralen等双分子交联以及微生物灭活(例如细菌,真菌,病毒),...
11-8
电穿孔仪电转杯主要由两个扁平的电极,一个带有过滤功能并且散布有直径大约为100nm纳米孔的碳酸脂膜(PC膜)以及一个用来支撑两个电极的支撑部分组成,在使用新装置进行生物大分子的转化时,先将需要传递的试剂加到底部的钛电极上,之后立即将带有膜的支撑部分放置到底部电极之上,接着第二片钛电极被放到整个装置的顶部,给两个电极之间施加电脉冲,使细胞膜上形成纳米孔,生物大分子得以进入细胞内部。电穿孔仪电转杯为一次性消耗品,实际上维护得好的话可以多次重复使用为提高重复使用寿命,请大家注意:1...
10-19
分子杂交炉广泛地使用于克隆基因的筛选、酶切图谱的制作、基因组中特定基因序列的定性、定量检测和疾病的诊断等方面。既可进行固相杂交或液相杂交,又可进行基因芯片杂交实验;亦能作酶联反应孵育器。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。核酸分子杂交是基因诊断的基本方法之一。它的基本原理是:互补的DNA单链能够在一定条件...
9-7
核酸分子杂交按其作用方式可大致分为固相杂交和液相杂交两种类型。固相杂交是将参加反应的一条核酸链先固定于固体基质上,一条参加反应的核酸链游离在溶液中,故也称为膜上印迹杂交。固体基质有硝酸纤维素滤膜,其他如尼龙膜、乳胶颗粒和微孔板等。液相杂交是指参加反应的两条核酸链都游离在溶液中,使之形成杂交复合物,不需固定支持物,反应束后,用羟基磷灰石法或酶解法将未被杂交的单链和杂交链分开。核酸分子杂交箱采用滚动式反应架装置,配套特制密封杂交管在水平轴上旋转,使杂交管内壁上的杂交反应膜各处能均...
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紫外交联仪是一个完整的、微处理器控制的紫外线照射系统,主要用于将核酸连接到膜和消除PCR污染。可编程微处理器持续监控紫外光发射。当辐照的能量与预设置的能量相匹配时,照射会自动停止。无论紫外线灯管的强度如何波动,辐照能量都可以实现重现。也是一种多用途的254mm紫外辐射系统,主要用于将核酸交联于膜上。还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化、UA灭菌消除PCR污染等。在紫外灭菌、聚合物紫外处理等方面也有应用价值。紫外交联仪特点:①...
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